A transferência de genes da espécie silvestre Lycopersicon peruvianum para a espécie L. esculentum por processo convencional de hibridação é limitada por incompatibilidade. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de obtenção de híbridos entre essas duas espécies, mediante a técnica de cultura de óvulos, tendo em vista o interesse em transferir genes presentes em acessos de L. peruvianum que conferem resistência a Septoria lycopersici. Foram utilizados os acessos CNPH 946, CNPH 947 e CNPH 948 de L. peruvianum e as cultivares Floradade e Ipa-5 de L. esculentum. Sementes híbridas de frutos com 25-68 dias após a polinização foram colocadas para germinar inicialmente em meio de cultura Murashige & Skoog (MS), e posteriormente em meio HLH. As sementes foram incubadas no escuro a 25°C. Só foram regenerados os híbridos provenientes das sementes colocadas para germinar em meio HLH. Dezesseis híbridos foram obtidos de 1.573 óvulos, sendo de 1% a taxa de regeneração de plantas híbridas. As características morfológicas dos híbridos F1 quando comparadas com os dois genitores indicaram que as plantas eram realmente resultado da hibridação entre L. esculentum e L. peruvianum.